KPXY204農殘速測試劑原理

    在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農藥的濃度呈正相關。正常情況下，酶催化神經傳導代謝產物 ( 乙酰膽堿 ) 水解，其水解產物與顯色劑反應，產生黃色物質，用分光光度計測定 412nm 下的吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機磷或氨基甲酸酯類農藥的存在。

2 、KPXY204農殘速測試劑試劑配制及保存

特別提示：本試劑盒可適用于不同廠家的各種型號農殘檢測儀及分光分度計，儀器操作根據其配套說明書方法，農殘檢測方法根據本試劑盒提供方法操作。

緩沖液： 取 1 包緩沖劑加入 500mL 純凈水中，攪拌溶解制成磷酸緩沖液 (pH 8.0) , 常溫保存。
顯色劑： 取 1 瓶顯色劑加 25mL 磷酸緩沖液溶解，使用時取 100 μ L 避光、 4 ℃保存。
底 物： 取 1 瓶底物加 12.5mL 蒸餾水溶解，使用時取 100 μ L ， 4 ℃冰箱保存；
或 取 1 瓶底物加 2.5mL 蒸餾水溶解 ，使用時取 20 μ L ， 4 ℃冰箱保存；
膽堿酯酶 ： 酶制劑無需配制，可直接取用， 4 ℃保存。

3 、樣品提取

    取 2g 果蔬樣品(塊莖類取 4g )剪成 1cm 左右見方碎片，放入小燒杯(或取樣瓶)中；加入 10mL 緩沖液，振蕩 1min～2min ，倒出提取液，靜置 2min 待測；

4 、測試

對照測試： 于反應瓶中加入 2.5mL 緩沖液， 再分別加入 100 μ L 顯色劑和酶液，混勻，靜置預反應 10min 后加入 100 μ L(或20μL)底物，搖勻并立即倒入比色杯中，放入測試通道， 按儀器“對照”鍵測試 1min的吸光度變值 ΔΑ 0 .

樣品測試： 于反應瓶中加入 2.5 mL 待測液， 其他操作與對照測試相同，測試 1 min的吸光度變化值 ΔΑ t .

結果判定： 以分光光度計測試 (412 nm 波長 ) 時，按以下公式計算出抑制率 : 抑制率 (%)=[( ΔΑ 0 －ΔΑ t )/ ΔΑ 0 ]×100 ；以農殘檢測儀檢測時其抑制率一般可自動計算。若樣品抑制率≥50%，表示被測果蔬農殘超標，為陽性結果。陽性結果的樣品需做 2 次以上重復檢測，多次檢測仍呈陽性需用氣相色譜等儀器做進一步確認。

小提示 1 ： 本試劑盒可在常溫條件下進行檢測，并可以滿足 GB/T 5009.199-2003 方法的要求。采用國標方法時，預反應時間為 15 min ，條件為 3 7℃水浴或恒溫培養箱；測試反應時間為3 min. 其余與上述方法相同。

小提示 2 ： 檢測時對照與樣品可同時檢測，而無需將兩者分開兩次檢測，每批檢測的時間應控制*，否則不具有可比性。

小提示 3 ： 底物的使用量根據配制時的體積決定，若稀釋成 12.5mL/瓶，則使用時加入100μL；若稀釋成2.5mL/瓶，則使用時加入20μL；國標方法中底物的使用量100μL.

小提示 4 ： 在加底物的環節中，可預先將底物加入比色杯，待靜置時間一到，馬上將反應瓶中的反應液倒入已經加有底物的比色杯，并迅速放入測試通道進行測試。這樣可以減少同時檢測多個樣品時因加底物時間過長而造成的誤差。

5 、注意事項：

    保存：試劑盒包含緩沖劑 10 包，膽堿酯酶 10 瓶，顯色劑 2 瓶，底物 4 瓶，可供 500 份樣品測試；使用前整盒試劑應保存 4 ℃冰箱，保質期 12 個月；室溫或常溫保存時，保質期 3~6 個月。 
    使用：任何試劑使用時，用一瓶打開一瓶，用完后才使用新的，防止變質。 
    器具原則：任何用于移液的器具和容器都應各自貼上標簽，單獨使用，以免交叉污染。
    試劑只出不入原則：測試時，從任何試劑瓶吸出的試劑，禁止再次注射回試劑瓶。

6 、的特點

( 1 )良好的穩定性：在 4 ℃條件下可以保存至少一年，常溫條件下保質期可長達 3 個月；
( 2 )專業化的制備技術：酶試劑調配成直接取用的液體狀態，為用戶減少稀釋酶液的麻煩及不確定因素；
( 3 )打破傳統方法所需的苛刻條件的限制：酶試劑可在常溫下直接使用(而無需 37 ℃條件)，使操作更加簡便快捷，并大大降低檢測設備的成本；
( 4 )檢測結果靈敏：zui低檢測限可達 0.1mg/kg 以下，對甲胺磷及樂斯本等常見農藥的檢測限均低于 0.8mg/kg ，優于相關國家國準要求；
( 5 )抗干擾性強：對芹菜、辣椒、韭菜等辛辣樣品同樣可檢測，不易受其植物次生物質的干擾；
( 6 )通用性：可以適用于同功能的幾乎所有型號的檢測儀器；
( 7 )樣品處理及檢測過程總時間不超過 15 min ，大量檢測時每均每個樣品檢測時間低于 5 min, 大大加快了檢測速度，節省檢測時間。 
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